鮭魚(yú)ELISA試劑盒檢測未知抗原的方法

       鮭魚(yú)ELISA試劑盒常用于檢測ELISA法定量測定血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中的含量，那么如何使用鮭魚(yú)ELISA試劑盒檢測未知抗原，常用的方法有雙抗體夾心法，下面我們來(lái)仔細說(shuō)說(shuō)。
1.　包被：用0.05M PH9，碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml，在每個(gè)聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過(guò)一晚上。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔）。
3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml，37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結果：反應孔內顏色越深，陽(yáng)性程度越強，陰性反應為無(wú)色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
     以上就是鮭魚(yú)ELISA試劑盒檢測未知抗原的雙抗體夾心法，希望對大家的檢測有所幫助。